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潔特生物-細(xì)胞嵌入皿
助力高質(zhì)論文發(fā)表
近日，中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所團(tuán)隊(duì)在Advanced Materials雜志發(fā)表了高質(zhì)論文A Universal Strategy for BBB Transport Mediated by an Inflammatory Receptor Antagonist for Neuroprotection in Ischemic Stroke，在其研究中使用到了潔特生物的細(xì)胞嵌入皿用于構(gòu)建血腦屏障模型。
文章解讀
01 研究成果
一種通過炎癥受體拮抗劑介導(dǎo)的血腦屏障通路的通用策略:用于缺血性腦卒中的神經(jīng)保護(hù)
在缺血性腦卒中治療中，血腦屏障(BBB)對(duì)治療藥物的選擇性滲透是主要障礙之一。腦缺血損傷后，腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞上的多種炎癥受體表達(dá)上調(diào)，為受體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)胞吞提供潛在靶點(diǎn)。
該研究提出了一種通用的藥物遞送策略:利用炎癥受體拮抗劑(如Serat, SQ29548, S18886等)作為靶向配體，與寡聚化花青素-3-葡萄糖苷（C3G）共組裝成納米顆粒（CCAs），這些拮抗劑既能幫助納米顆粒穿越BBB，又能調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)神經(jīng)保護(hù)。
拮抗劑偶聯(lián)納米顆粒通過受體靶向策略治療缺血性腦卒中示意圖
02研究方法
使用細(xì)胞嵌入皿進(jìn)行的體外實(shí)驗(yàn)
在該研究的體外實(shí)驗(yàn)中，使用了潔特生物的細(xì)胞嵌入皿構(gòu)建血腦屏障模型(上腔腦內(nèi)皮細(xì)胞，下腔神經(jīng)細(xì)胞)，驗(yàn)證了與炎癥受體拮抗劑結(jié)合的基于C3G的納米顆粒穿越體外血腦屏障模型并實(shí)現(xiàn)神經(jīng)保護(hù)的能力與作用機(jī)制。
細(xì)胞嵌入皿構(gòu)建的BBB模型示意圖（左）
本研究中使用的潔特生物24孔細(xì)胞嵌入皿（右）
驗(yàn)證1
使用細(xì)胞嵌入皿BBB模型評(píng)估一系列與相應(yīng)拮抗劑或激動(dòng)劑結(jié)合的基于C3G的納米顆粒穿越血腦屏障的能力，受體介導(dǎo)作用，以及抗炎與抗氧化作用。（包括缺乏受體靶向配體的納米顆粒CC；拮抗劑修飾的納米顆粒CCS、CCSQ、CCS18、CCBD、CCNC；激動(dòng)劑修飾的納米顆粒CCU4、CC1V）
A)通過Cy3熒光監(jiān)測(cè)，下腔PC12細(xì)胞內(nèi)化了不同的制劑，表明成功地穿透了血腦屏障。另外，拮抗劑組有明顯更強(qiáng)的熒光信號(hào)，表明拮抗劑的存在促進(jìn)了受體介導(dǎo)的跨細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)；
B)通過Cy3熒光監(jiān)測(cè)，上腔bEnd.3細(xì)胞攝取CC、CCS、CCSQ、CCS18、CCU4。通過與對(duì)應(yīng)的游離拮抗劑配體的共同孵育來評(píng)估納米顆粒攝取的競(jìng)爭(zhēng)性抑制。內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)拮抗劑修飾的納米顆粒的攝取顯著增加，證實(shí)了有效的受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用；
C-F)游離配體或不同納米制劑處理后PC12細(xì)胞中腫瘤壞死因子-??和精氨酸-1的相對(duì)表達(dá)水平。拮抗劑組顯著抑制了促炎因子TFN-α的表達(dá)和上調(diào)了抗炎因子Arg-1的表達(dá)，表明它們?cè)诎邢虻耐瑫r(shí)具有免疫調(diào)節(jié)抗炎作用；
G)OGD和隨后的CCA處理后PC12細(xì)胞內(nèi)ROS水平，通過DCFH-DA染色評(píng)估。拮抗劑組的ROS相關(guān)的熒光顯著減少，表明它們具有很強(qiáng)的抗氧化作用。
驗(yàn)證2
使用細(xì)胞嵌入皿BBB模型研究了以CCS為代表的炎癥受體拮抗劑修飾的納米顆粒對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)途徑和保護(hù)作用，以及治療干預(yù)后血腦屏障完整性的恢復(fù)以及其通透性情況。
A)使用細(xì)胞嵌入皿構(gòu)建的BBB模型示意圖；CCS在細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸途徑示意圖（溶酶體逃逸、高爾基體介導(dǎo)的胞吐作用和血腦屏障恢復(fù)反應(yīng)）；
B)Tx2AR炎癥受體在bEnd.3細(xì)胞膜上的免疫熒光染色及其與CC和CCS的共存。CCS表現(xiàn)出更高的信號(hào)強(qiáng)度，表明了拮抗劑介導(dǎo)的機(jī)制，通過改善跨血腦屏障的跨細(xì)胞作用來支持納米顆粒的傳遞；
C-E)共聚焦圖像顯示CCS與內(nèi)皮細(xì)胞中的溶酶體、高爾基體和線粒體共存。驗(yàn)證了CCS的雙重運(yùn)輸途徑：一部分CCS NPs逃離溶酶體室，進(jìn)行內(nèi)皮結(jié)構(gòu)的修復(fù)，另一部分通過高爾基體遞送至神經(jīng)元發(fā)揮抗氧化和抗炎作用；
F)圖C、D和E實(shí)驗(yàn)結(jié)果的定量分析；
G)反映bEnd.3單層屏障完整性的跨內(nèi)皮細(xì)胞電阻(TEER)測(cè)量。CCS組表現(xiàn)出顯著的修復(fù)性；
H)BECs的劃痕愈合模型圖像。CCS組的內(nèi)皮修復(fù)性能優(yōu)于所有其他組。
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潔特生物-細(xì)胞嵌入皿
精準(zhǔn)模擬 賦能科研
01產(chǎn)品簡(jiǎn)介
細(xì)胞嵌入皿常用于各類細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，利用膜技術(shù)模擬細(xì)胞原始生長(zhǎng)環(huán)境，使體外生長(zhǎng)的細(xì)胞在形態(tài)、功能上更接近體內(nèi)生長(zhǎng)的細(xì)胞。
潔特生物細(xì)胞嵌入皿優(yōu)選聚碳酸脂（PC）和聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯（PET）透薄膜，孔密度高，能完成各類跨膜物質(zhì)交換，廣泛用于細(xì)胞共培養(yǎng)、細(xì)胞分子運(yùn)輸?shù)葘?shí)驗(yàn)中，進(jìn)行運(yùn)輸、吸收和分泌等細(xì)胞功能研究。該產(chǎn)品提供多種膜孔徑和規(guī)格可供選擇，還提供插入式培養(yǎng)皿，可覆蓋客戶多元化的實(shí)驗(yàn)需求。
* 規(guī)格：?jiǎn)慰祝?00mm）、6孔、12孔、24孔
* 類型：懸掛式、插入式
* 膜孔徑：0.1μm、0.4μm、1.0μm、3.0μm、5.0μm、8.0μm、12.0μm
* 材質(zhì)：膜聚碳酸酯(PC)/聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯(PET)；主體聚苯乙烯（PS），均符合USP Class VI標(biāo)準(zhǔn)
02 產(chǎn)品特點(diǎn)
產(chǎn)品結(jié)構(gòu)展示
兩種膜材 各有優(yōu)勢(shì)
專注細(xì)節(jié) 造就高品質(zhì)
GMP潔凈車間生產(chǎn)
訂購(gòu)信息
100mm細(xì)胞嵌入皿
PC膜插入式培養(yǎng)皿
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